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萊恩德大腸肝菌檢測儀檢測大腸菌群的方法步驟

作者:admin    發(fā)布時間:2021-07-14 01:49:38     瀏覽次數(shù) :783


萊恩德大腸肝菌檢測儀檢測大腸菌群的方法步驟:
1、適用范圍:適用于各類食品、原料和純凈水等樣品中大腸菌群的快速檢測。
2、檢測原理:將乳糖、顯色劑和選擇性培養(yǎng)基加載在紙片上,經(jīng)培養(yǎng)后能夠在紙片上生長并發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸的即為大腸菌群陽性,記錄每個稀釋度大腸菌群陽性紙片數(shù),根據(jù)大腸菌群MPN表查出相應的大腸菌群數(shù)。
3、分析特點:與國標法中的九管法相對應,將原來幾步的試驗簡化為一步,時間由78h縮短為24h以內(nèi),省去了制備培養(yǎng)基、消毒和培養(yǎng)器皿的清洗處理等大量輔助性工作,隨時可以打開包裝進行抽樣檢測。 
4、方法步驟
   (1)樣品處理:無菌稱取樣品25g(或25mL)放入含有225mL滅菌生理鹽水的采樣瓶或均質(zhì)杯中,經(jīng)充分振搖做成1:10的樣品勻液,用1mL滅菌吸管吸取1:10樣品勻液,注入含有9mL滅菌生理鹽水的試管內(nèi),振搖試管制成1:100的稀釋液。以此類推,每個稀釋度更換一支滅菌吸管。
   (2)接種:選取兩個稀釋度進行接種,普通食品一般采用1:10和1:100這兩個稀釋度,飲料和飲用水采用原液和1:10兩個稀釋度。每份由三片大紙片(接10mL),六片小紙片(接1mL)組成,大片每小袋二張疊放算作一片。用滅菌吸管吸取10 mL 1:10稀釋液加到含有大紙片的塑料袋中(相當于接樣品1g),吸透后平放,做三個重復。再用1mL滅菌吸管吸取1 mL同一稀釋液涂布到含有小紙片的塑料袋中(相當于接樣品0.1g),做三個重復。再取一支1 mL滅菌吸管吸取1 mL 1:100稀釋液涂布到含有小紙片的塑料袋中(相當于接樣品0.01g),做三個重復。
  (3)培養(yǎng):將接種好的紙片(可疊放)放入37°C培養(yǎng)箱中培養(yǎng)15h~24h。 
5、結(jié)果判斷與計數(shù):若紙片變黃或在黃色背景上呈現(xiàn)紅色斑點為大腸菌群陽性紙片。紙片保持紫蘭色不變或在紫蘭色背景上呈現(xiàn)紅色斑點,但周圍沒有黃色均為大腸菌群陰性紙片。記錄每個稀釋度大腸菌群陽性紙片數(shù),根據(jù)大腸菌群MPN表查出相應的大腸菌群數(shù)。如接種的第一個稀釋度的稀釋液為原液,應將表上查出的結(jié)果除以10,以此類推。 
6、注意事項:如果樣品的酸堿度在pH7以下,應先用滅菌1mol/L氫氧化鈉(NaOH)調(diào)節(jié)溶液調(diào)至中性,避免因pH的原因?qū)е碌募埰凕S而影響結(jié)果觀察。
 


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